Er zijn veel manieren om bacteriegroei te meten, en de ene manier is ingewikkelder dan de andere. Hoewel soms de consistentie van de meting moet worden genegeerd, is de eenvoudigste manier voldoende om de bacteriegroei nauwkeurig te meten, dus deze wordt vaak gebruikt. De meest gebruikte methoden zijn het monitoren en tellen van bacteriën, het meten van droge of natte massa en het meten van troebelheid/troebelheid. Het laboratorium van uw school moet over de gereedschappen en apparatuur beschikken die nodig zijn om ten minste één van deze experimenten uit te voeren.
Stap
Methode 1 van 3: Bacteriën live volgen
Stap 1. Bereid de ingrediënten voor
Er zijn veel speciale hulpmiddelen die moeten worden voorbereid en die mogelijk niet beschikbaar zijn in een biologielaboratorium. Bereid alle apparatuur en containers voor voordat u het experiment uitvoert, zodat er geen gedoe is tijdens het proces. U moet elk ingrediënt dat meteen wordt gebruikt, en de basisvoorwaarden van dit experiment kennen.
- Bereid de telkamer voor. Het heeft een ingebouwde kamer, microscoopglas en microscoop, dus het is gemakkelijk in te stellen en te gebruiken. Je kunt het kopen bij een winkel voor laboratorium- of schoolbenodigdheden. Deze tool zou instructies moeten hebben die u door het hele proces leiden.
- Zet een schenkbeker of spreidbeker klaar. Met beide containers kunt u de bacteriën binnenin volgen.
- Cultuur is een term die wordt gebruikt om de groei van organismen in een experiment te beschrijven.
- Bouillon is een vloeibaar medium waarin de cultuur groeit.
Stap 2. Gebruik de gietplaat- of spreidplaatmethode
U kunt de bacteriën ook direct op de schaal plaatsen om ze met een microscoop te bekijken. Giet de cultuur op een schotel en plaats deze onder de microscoop. Controleer het aantal aanwezige bacteriële cellen.
Stap 3. Zorg ervoor dat de concentratiedosis juist is
Als er te veel zijn, stapelen de bacteriën zich op elkaar op en kun je een misrekening maken. Verdun de cultuur door er meer bouillon bij te mengen. Als er te weinig zijn, zijn de resultaten van de berekening niet nauwkeurig. Zeef de bouillon met behulp van een filtratiesysteem.
Stap 4. Bacteriën tellen
De laatste stap is om de bacteriën één voor één te tellen. Kijk door de vergrootlens in de telkamer en noteer het aantal bacteriën dat je ziet. Vergelijk de resultaten met de resultaten van andere tests.
Methode 2 van 3: Droge en natte massa meten
Stap 1. Zorg voor de juiste apparatuur
Deze methode gebruikt dure apparatuur en veel tijd. Als uw laboratorium niet over de apparatuur beschikt die u nodig heeft, is het een goed idee om een andere methode te gebruiken. Als uw laboratorium echter voldoende goed is uitgerust, raden we deze methode aan omdat deze meer consistente resultaten oplevert. Bij deze methode heb je nodig:
- Hydraulische zwaartekracht convectieoven
- Weegcontainer van aluminium
- Een set kolven (laboratoriumflessen)
- Centrifugaalmachine (centrifuge) of laboratoriumfiltratiesysteem
Stap 2. Zorg ervoor dat de kweek in de kolf zit
Voeg de cultuur toe aan de pompoen. In dit stadium moet de cultuur een bouillon zijn, hoewel deze later weer zal worden gescheiden.
Stap 3. Droog de aluminium weegcontainer in de laboratoriumoven
In plaats daarvan kunt u een filtermembraan van celluloseacetaat gebruiken met een diameter van 47 mm en een poriegrootte van 0,45 µm. Welke weegcontainer u ook gebruikt, weeg deze, want deze moet later worden afgetrokken bij het wegen van bacteriële cellen.
Stap 4. Roer de cultuur in de kolf totdat deze gelijkmatig is gemengd
De cel zal door de zwaartekracht op natuurlijke wijze zinken en moet worden geroerd om zich gelijkmatig in de kolf te verspreiden. Op die manier kunt u meer monsters hebben.
Stap 5. Gebruik een centrifuge om de bacteriecellen van de bouillon te scheiden
Dit gereedschap draait de kolf en komt snel in evenwicht, zodat de bouillon wordt afgevoerd en de cultuur in de kolf blijft.
Stap 6. Schraap de pasta van de pompoen en doe deze in een weegbak
Gooi de bouillon weg, want die heb je niet meer nodig. Gooi de pompoen echter nog niet weg, want deze zal nog steeds worden gebruikt.
Stap 7. Spoel de centrifugaalmachine om en giet het spoelwater in de container
Laat het spoelwater in de kolf op de bacteriecellen vallen om het natte gewicht te verkrijgen.
Stap 8. Zoek het drooggewicht
Om het drooggewicht te meten, plaatst u de container in de oven en droogt u deze 6-24 uur op 100ºC volgens de instructies van de gebruikte oven en/of weegcontainer. Zorg ervoor dat de temperatuur niet te hoog is zodat de bacteriën niet verbranden. Weeg de bacteriën als je klaar bent, en vergeet niet om het resultaat te verminderen door het gewicht van de weegcontainer.
Methode 3 van 3: Troebelheid meten
Stap 1. Bereid de benodigde apparatuur voor
Je hebt een lichtbron en een spectrofotometer nodig. Beide zijn verkrijgbaar bij laboratoriumbenodigdheden. De spectrofotometer moet instructies hebben die u zullen begeleiden bij het gebruik van het instrument volgens het model dat u heeft. De prijs van de spectrofotometer is redelijk betaalbaar en gemakkelijk te gebruiken, zodat het een van de meest gebruikte methoden kan worden voor het meten van bacteriegroei.
Stap 2. Steek het monster aan
Volgens de term van de leek is troebelheid het niveau van troebelheid van een monster. U hebt het nummer van de troebelheidsmeting nodig, dat wordt gemeten in NTU (nefelometrische troebelheidseenheid). Dit instrument moet worden gekalibreerd voordat het het monster nauwkeurig kan meten.
Stap 3. Noteer de resultaten
Troebelheid wordt beïnvloed door het aantal bacteriën in het monster. De spectrofotometer geeft ook het transmissiepercentage (%T) aan. Dit cijfer zal toenemen als de troebelheid afneemt. Vergelijk de resultaten met de resultaten van andere tests om bacteriegroei te meten.
Waarschuwing
- Aangezien u te maken heeft met een bacteriekolonie, dient u voorzorgsmaatregelen te nemen door veiligheidsuitrusting te dragen, zoals een veiligheidsbril en handschoenen. Het is ook een goed idee om een masker te dragen, vooral als je niet weet welk type bacterie wordt onderzocht.
- Neem voorzorgsmaatregelen voordat u een type bacterie aanraakt, zelfs het onschadelijke type. Zorg ervoor dat alle open wonden op je lichaam volledig bedekt zijn voordat je begint.
