Pipetten zijn laboratoriumapparatuur die wordt gebruikt om zeer kleine hoeveelheden vloeistoffen te meten en over te brengen. Nauwkeurigheid in pipetmetingen is erg belangrijk omdat verschillen in het volume dat door de pipet wordt gedropt de experimentele resultaten kunnen beïnvloeden. Om de nauwkeurigheid te garanderen, is het belangrijk om de pipetkalibratie om de paar maanden te controleren. Het kalibratieproces is handig om te controleren of deze apparatuur vloeistof in het juiste volume druppelt, zodat reparaties indien nodig kunnen worden uitgevoerd.
Stap
Deel 1 van 2: Kalibratie controleren
Stap 1. Verzamel de benodigde materialen
Om de kalibratie van de pipet te controleren, heeft u een pipet, pipetpunten, gedestilleerd water, beker, thermometer, balans en weegbeker nodig. De gebruikte balans moet op microgramschaal zijn om de micropipet te kalibreren met een maximale waarde van 1 L.
- U heeft niet meer dan 5 ml water nodig. Vul het bekerglas met water.
- Zorg ervoor dat de pipetpunt correct is en goed in de pipet past.
Stap 2. Meet de temperatuur van het gedestilleerde water
Leg de thermometer in het water en laat hem minstens een minuut staan. Als de rode lijn van de thermometer nog steeds beweegt, wacht dan nog een minuut. Noteer na een minuut de temperatuur. Pak de thermometer en droog hem af als je klaar bent.
De temperatuur van het water is belangrijk om te weten, omdat deze zal worden gebruikt voor berekeningen die worden uitgevoerd om de kalibratie te controleren
Stap 3. Plaats de weegbeker op de weegschaal en zet de weegschaal op nul
Idealiter heeft de gebruikte balans een deur en een geïsoleerde ruimte binnenin. Plaats de weegbeker in de balanskamer en sluit de deur. Als uw weegschaal geen hokje en deur heeft, plaatst u gewoon een weegbeker op de weegschaal. Druk op de knop "Zero" of "Tare" en wacht tot de weegschaal nul aangeeft.
Door de weegschaal op nul te zetten, wordt het gewicht van de plastic beker verminderd en kunt u alleen het gewicht van de in de beker geplaatste substantie wegen
Stap 4. Bereid de pipet voor op kalibratie
Veeg de pipet af met ethanol voordat u begint en zorg ervoor dat niets de punt van de pipet verstopt. Bevestig de juiste pipetpunt aan de pipetpunt en bepaal het te testen volume.
Test voor kalibratie de kleinste en grootste volumes die uit de pipet kunnen worden verwijderd
Stap 5. Was de pipetpunt voordat u deze kalibreert
Druk op de knop tot de eerste limiet en dompel de punt van de pipet in het gedestilleerde water tot een diepte van ongeveer 2 mm. Laat de knop los om een deel van de vloeistof op te nemen en laat de vloeistof vervolgens weer los door op de knop te drukken. Herhaal deze stap drie keer om de druppelaartips voor gebruik te wassen.
Druk op de knop tot de tweede limiet om de resterende vloeistof op de pipetpunt te verwijderen en haal de pipet vervolgens uit het water
Stap 6. Zuig het kalibratievolume op
Met de pipetpunt buiten het gedistilleerde water geplaatst, drukt u op de knop tot de eerste limiet. Dompel de pipetpunt 2 mm diep in het gedestilleerde water en laat de knop los om de vloeistof in de pipetpunt te zuigen. Wacht ongeveer 1 seconde voordat u de druppelaar uit het water haalt.
Zorg ervoor dat de pipetpunt volledig is ondergedompeld tijdens het aspiratieproces. Er mogen geen luchtbellen in de druppelaar zitten, anders kan het resultaat verkeerd zijn
Stap 7. Giet de vloeistof in de weegschaal op de balans
Plaats de pipetpunt op de bodem van de weegbeker en druk vervolgens op de pipetknop tot de eerste limiet. Ga naar een ander punt, een beetje weg van het water, en druk dan op de knop tot de tweede limiet. Houd de knop ingedrukt en til de pipetpunt van de weegbeker.
Houd de punt vast aan de pipet, want u zult hem opnieuw gebruiken voor andere kalibratietests
Stap 8. Noteer het gewicht dat op de weegschaal staat
Sluit de deur van de balanscabine als u een deurbalans gebruikt. Wacht tot de cijfers niet meer veranderen. Schrijf in je schrift.
Het is belangrijk om te wachten tot de cijfers op de weegschaal niet meer veranderen voordat u ze opschrijft. Notities gaan fout als je niet wacht
Stap 9. Herhaal dit proces om de meting minstens 10 keer uit te voeren
Zet de schaal opnieuw op nul, was de pipetpunten voor gebruik, zuig hetzelfde volume vloeistof op, verwijder het volume en noteer vervolgens het gewicht. Noteer het gewicht van gedistilleerd water voor hetzelfde volume en neem vervolgens het gemiddelde van al uw aantekeningen.
U kunt dit proces herhalen voor verschillende volumes als elk volume meerdere keren wordt getest
Deel 2 van 2: Het kalibratieresultaat berekenen
Stap 1. Definieer de formule voor het berekende volume
De formule voor het berekenen van het vloeistofvolume dat door de pipet wordt uitgestoten is V = w * Z, w is het gewicht van het water, Z is de conversiefactor op basis van de dichtheid van het water, terwijl V het volume is van de hoeveelheid water VERWIJDERD.
- Variabele Z kan worden verkregen door de dichtheid van water te berekenen met behulp van de temperatuur die aan het begin van het experiment is geregistreerd.
- Bijvoorbeeld: Als de watertemperatuur 23°C is, is de Z-waarde 1,0035 g/mg.
Stap 2. Bereken het totale gemiddelde van de pipetkalibraties
De hoeveelheid water die door de pipet vrijkomt, is minstens tien keer gewogen. Om al deze waarden te middelen, tel je ze allemaal bij elkaar op en deel je ze door 10. Als je meer of minder van het proces hebt gedaan, tel je de totale resultaten op en deel je deze door het aantal uitgevoerde proeven.
- Bijvoorbeeld: Het gewicht van het water van de 10 experimenten die u met de 10µL-pipet hebt uitgevoerd, is als volgt: 9, 89, 10, 01, 10, 02, 9, 99, 9, 95, 10, 04, 9, 96, 10, 01, 9, 99 en 9, 98.
- Het gemiddelde is: (9, 89 + 10, 01 + 10, 02 + 9, 99 + 9, 95+ 10, 04 + 9, 96 + 10, 01 + 9, 99 + 9, 98)/10 = 99, 84 /10 = 9.984
Stap 3. Vul de variabelen in de vergelijking in en los ze op
Zodra u het juiste aantal voor elke variabele hebt bepaald, voegt u het toe aan de formule en voltooit u het berekende volume. Om deze vergelijking op te lossen, vermenigvuldigt u eenvoudig het gemiddelde gewicht van alle proeven met de Z-waarde.
Bijvoorbeeld: V = w * Z = 9.984 * 1.0035 = 10, 019
Stap 4. Bereken de nauwkeurigheid van de pipet
Gebruik de vergelijking A = 100 x Vgemiddeld/V0 om de nauwkeurigheid van de pipet te berekenen. A geeft pipetnauwkeurigheid aan, Vgemiddeld is het berekende gemiddelde volume, en V0 is de waarde die op de pipet is ingesteld. De nauwkeurigheidswaarde moet tussen 99-101% liggen.
- Als de pipet correct is gekalibreerd, moet de berekende waarde zeer dicht bij de werkelijke waarde liggen die op de pipet is ingesteld.
- Bijvoorbeeld: A = 100 x Vgemiddeld/V0 = 100 x 10, 019/10 = 100 x 1,0019 = 100,19%
- Deze pipet is correct gekalibreerd.
Stap 5. Stuur indien nodig de pipet op voor kalibratie
Als uw pipet de kalibratietest niet doorstaat, gebruik hem dan nu niet voor experimenten. Pipetten zijn zeer kwetsbare en dure laboratoriumapparatuur. U kunt de kalibratie niet zelf repareren, de pipet moet worden opgestuurd voor reparatie. Als alternatief komen meerdere bedrijven naar uw laboratorium om de pipet ter plaatse te kalibreren.
