In de chemie is verdunning het proces waarbij de concentratie van een stof in een oplossing wordt verlaagd. Ketenverdunning is de herhaalde verdunning van een oplossing om de verdunningsfactor snel te verhogen. Deze procedure wordt meestal uitgevoerd in experimenten die zeer verdunde oplossingen met hoge nauwkeurigheid vereisen. Bijvoorbeeld experimenten met concentratiecurven op logaritmische schaal of experimenten om de dichtheid van bacteriën te bepalen. Ketenverdunningen worden veel gebruikt in wetenschappelijke experimenten zoals biochemie, microbiologie, farmacologie en natuurkunde.
Stap
Methode 1 van 2: Basisverdunning uitvoeren
Stap 1. Bepaal de juiste verdunningsoplossing
Het is erg belangrijk om te bepalen welke vloeistof voor verdunning moet worden gebruikt. Veel oplossingen zijn oplosbaar in gedestilleerd water, maar dit is niet altijd het geval. Als je bacteriën of andere cellen verdunt, doe dat dan op een kweekmedium. De vloeistof die u kiest, wordt gebruikt voor alle ketenverdunningen.
Als u twijfelt over welk verdunningsmiddel u moet gebruiken, zoek dan hulp of kijk online. Zoek naar voorbeelden van anderen die soortgelijke ketenverdunningen hebben gedaan
Stap 2. Maak een aantal reageerbuisjes klaar met 9 ml verdunningsmiddel
Reageerbuisjes worden gebruikt voor lege verdunningen. Doe eerst het onverdunde monster in het eerste buisje en voer vervolgens de verdunningen achtereenvolgens uit naar de volgende buisjes.
- Label alle gebruikte buizen voordat u met de verdunning begint, zodat u niet in de war raakt als het experiment eenmaal loopt.
- Elke buis wordt gevuld met 10 verdunningen, te beginnen met de buis waarvan de stof niet is verdund. De verdunning in de eerste buis is 1:10, gevolgd door 1:100 in de tweede buis, 1:1000 voor de derde, enzovoort. Bepaal vooraf de hoeveelheid verdunning die moet worden uitgevoerd, zodat u de verdunningsoplossing niet verspilt.
Stap 3. Bereid een reageerbuis voor met ten minste 2 ml onverdunde oplossing
De minimale hoeveelheid te verdunnen oplossing die nodig is om deze ketenverdunning uit te voeren, is 1 ml. Als u slechts 1 ml gebruikt, blijft er geen onverdunde oplossing over. Label BLM voor onverdunde oplossingen.
Meng de oplossing grondig voordat u met een verdunning begint
Stap 4. Voer de eerste verdunning uit
Neem 1 ml van de onverdunde oplossing uit de BLM-reageerbuis met een pipet en doe deze in een reageerbuis met het label 1:10 met 9 ml verdunningsmiddel, en meng vervolgens grondig. Er is nu 1 ml van de onverdunde oplossing in 9 ml van het verdunningsmiddel. De oplossing is dus verdund met een verdunningsfactor van 10.
Stap 5. Voer de tweede verdunning uit
Neem voor de tweede verdunning 1 ml van de oplossing uit de 1:10-buis en doe deze vervolgens in de 1:100-buis die ook 9 ml van het verdunningsmiddel bevat. Zorg ervoor dat de oplossing in de 1:10-buis volledig is gemengd voordat u deze aan de volgende buis toevoegt. Zorg er opnieuw voor dat de verdunning in de 1:100-buis volledig is gemengd. De oplossing uit de 1:10 buis werd 10-voudig verdund in de 1:100 buis.
Stap 6. Ga door met deze procedure om langere ketenverdunningen uit te voeren
Dit proces kan zo vaak worden herhaald als nodig is om de gewenste oplossingsconcentratie te verkrijgen. In experimenten met concentratiecurven kun je ketenverdunningen uitvoeren om een aantal oplossingen te produceren met verdunningen van 1, 1:10, 1:100, 1:1.000.
Methode 2 van 2: Berekening van de verdunningsfactor en uiteindelijke concentratie
Stap 1. Bereken de verhouding van de laatste verdunning in de ketenverdunning
De totale verdunningsverhouding kan worden bepaald door de verdunningsfactor van elke stap tot de laatste stap te vermenigvuldigen. De wiskundige illustratie is met de formule Dt = D1 x D2 x D3 x … x D , NSt is de totale verdunningsfactor en D is de verdunningsverhouding.
- Laten we bijvoorbeeld zeggen dat u 4 keer een verdunning van 1:10 doet. Plug de verdunningsfactor in de formule: Dt = 10 x 10 x 10 x 10 = 10.000
- De verdunningsfactor in het vierde buisje in deze ketenverdunning is 1:10.000. De concentratie van de stof na de verdunning is 10.000 keer lager dan voor de verdunning.
Stap 2. Bepaal de concentratie van de oplossing na verdunning
Om de eindconcentratie van een oplossing na een ketenverdunning te bepalen, moet u de beginconcentratie weten. De formule is Ceinde = Cbegin/D, Ceinde is de eindconcentratie van de verdunde oplossing, Cbegin is de beginconcentratie van de oorspronkelijke oplossing en D is de vooraf bepaalde verdunningsverhouding.
- Bijvoorbeeld: als u begint met een celoplossing waarvan de concentratie 1.000.000 cellen per ml is en de verdunningsverhouding 1.000, wat is dan de uiteindelijke concentratie van het verdunde monster?
-
Door de formule te gebruiken:
- Ceinde = Cbegin/NS
- Ceinde = 1.000.000/1.000
- Ceinde = 1000 cellen per ml.
Stap 3. Zorg ervoor dat alle eenheden hetzelfde zijn
Zorg er bij het uitvoeren van een berekening voor dat de eenheden aan het einde van de berekening altijd hetzelfde zijn. Als de initiële eenheid cellen per ml is, zorg er dan voor dat de eenheden aan het einde van de berekening hetzelfde blijven. Als de beginconcentratie delen per miljoen (bpd) is, dan moet de eindconcentratie ook in bpj-eenheden zijn.
